高效小核酸转染试剂
货号:
GentFect RNAi in vitro规格:
产品详情
产品简介
GentFect RNAi in vitro 是一种由脂质体介导的转染试剂,适用于多种贴壁或悬浮细胞的siRNA 、miRNA mimic 、inhibitor 和 ASO 等转染。科学的N/P比使用策略,大大减少转染试剂用量及实验成本。
产品组分
组分 | GG001-01 | GG001-05 | GG00-10 |
Reagent A | 0.5mL | 2mL | 4mL |
Reagent B | 0.1mL | 0.5mL | 1mL |
保存条件
2~8℃保存,一年有效
使用方法
细胞接种
提前一天接种细胞,不同培养体系的接种数量参考表 2。
siRNA 转染复合液形成
提前将Reagent A 和 Reagent B 恢复至室温并涡旋混匀。
表 1.不同浓度 siRNA 转染复合液配制方法
siRNA 溶液(20 μM) |
Reagent A |
Reagent B |
细胞培养液 |
|
siRNA 转染复合液(100 nM) |
1.0 µL |
7.0 µL |
2.0 µL |
190 µL |
siRNA 转染复合液(500 nM) |
5.0 µL |
35.0 µL |
10.0 µL |
150 µL |
注:1)请严格按照上图顺序加样配液;
2)siRNA 浓度不变的情况下,如需使用其它体积,等比例调整siRNA 转染复合液中四种溶液的体积即可。 如需其它浓度siRNA转染复合液,维持 siRNA 溶液:A:B 体积比不变,改变细胞培养液体积即可。
细胞转染
按表 2 推荐量将配制好的 siRNA 转染复合液加入各细胞孔中,轻轻摇动培养板使其分散混匀。
细胞培养
过夜培养24 - 48 h,如果转染后需要更换新鲜培养基,请在加入转染复合物后24 h后更换。建议 24 h 测定 mRNA、48h测定蛋白水平
表 2. 不同培养体系siRNA 样品加入量
接种细胞数 |
接种细胞时培养液 |
siRNA 转染复合液加入量 |
|
96 孔板 |
0.5~2 万 |
0.1 mL |
10 µL |
48 孔板 |
2.5~10 万 |
0.25 mL |
25 µL |
24 孔板 |
5~20 万 |
0.5 mL |
50 µL |
12 孔板 |
10~50 万 |
1.0 mL |
100 µL |
6 孔板 |
25~100 万 |
2.0 mL |
200 µL |
注:按表 2 加入 siRNA 转染复合液,各孔 siRNA 终浓度为siRNA 转染复合液浓度的 1/10;
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