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高效小核酸转染试剂

高效小核酸转染试剂

货号:

GentFect RNAi in vitro

规格:

0.1mL
0.5mL
1mL
2mL

产品详情

产品简介

GentFect RNAi in vitro 是一种由脂质体介导的转染试剂,适用于多种贴壁或悬浮细胞的siRNA 、miRNA mimic 、inhibitor 和 ASO 等转染。科学的N/P比使用策略,大大减少转染试剂用量及实验成本。

产品组分

组分 GG001-01 GG001-05 GG00-10
Reagent A 0.5mL 2mL 4mL
Reagent B 0.1mL 0.5mL 1mL

 

保存条件

 

2~8℃保存,一年有效

使用方法

细胞接种

提前一天接种细胞,不同培养体系的接种数量参考表 2。

 

siRNA 转染复合液形成

提前将Reagent A 和 Reagent B 恢复至室温并涡旋混匀。

 

WX20250425-101413

 

表 1.不同浓度 siRNA 转染复合液配制方法

 

 

siRNA 溶液(20 μM)

Reagent A

Reagent B

细胞培养液

siRNA 转染复合液(100 nM)

1.0 µL

7.0 µL

2.0 µL

190 µL

siRNA 转染复合液(500 nM)

5.0 µL

35.0 µL

10.0 µL

150 µL

注:1)请严格按照上图顺序加样配液;

2)siRNA 浓度不变的情况下,如需使用其它体积,等比例调整siRNA 转染复合液中四种溶液的体积即可。 如需其它浓度siRNA转染复合液,维持 siRNA 溶液:A:B 体积比不变,改变细胞培养液体积即可。

 

细胞转染

按表 2 推荐量将配制好的 siRNA 转染复合液加入各细胞孔中,轻轻摇动培养板使其分散混匀。

 

细胞培养

过夜培养24 - 48 h,如果转染后需要更换新鲜培养基,请在加入转染复合物后24 h后更换。建议 24 h 测定 mRNA、48h测定蛋白水平

 

表 2. 不同培养体系siRNA 样品加入量

 

 

接种细胞数

接种细胞时培养液

siRNA 转染复合液加入量

96 孔板

0.5~2 万

0.1 mL

10 µL

48 孔板

2.5~10 万

0.25 mL

25 µL

24 孔板

5~20 万

0.5 mL

50 µL

12 孔板

10~50 万

1.0 mL

100 µL

6 孔板

25~100 万

2.0 mL

200 µL

注:按表 2 加入 siRNA 转染复合液,各孔 siRNA 终浓度为siRNA 转染复合液浓度的 1/10;

 

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