亲和力检测的“黄金组合”：君跻生物BLI技术如何平衡速度与精度？

发布时间：2026-08-27

在抗体药物的研发中，科学家们常常面临一个核心问题：我手中的这支抗体，到底跟它的目标抗原“贴”得有多紧？

这个“贴紧”的程度，在科学上就叫做亲和力（Affinity）。亲和力越高，抗体与抗原的结合就越牢固，药物的效果也就可能越好。那么，如何精准地测量这种结合强度呢？

BLI：一把测量分子互作的“光学尺子”

BLI（Bio-Layer Interferometry，生物膜干涉技术）是一种无需标记、实时监测的光学检测技术。

在BLI传感器末端有一层生物膜，科学家把其中一个分子（比如抗体）固定在膜上。当另一个分子（比如抗原）从溶液中结合上来时，生物膜厚度就会增加。一束光打到传感器上，会在不同界面形成反射并产生干涉。膜厚度的微小变化会导致干涉光谱发生位移。仪器实时记录这个位移，就能“看见”分子结合与解离的整个过程。

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BLI技术凭借无标记、实时监测、高通量、样品消耗少等优势，在抗体药物研发、蛋白互作研究等领域得到了广泛应用。

单点结合：从“多”里面快速筛出“少”

单点结合（Single-Point Binding），就是只用一个固定浓度的抗原去测试抗体。

在抗体发现的早期阶段，科学家们往往要面对成百上千个候选抗体。单点结合检测的优势就在于速度快、通量高。通常只需将抗原设定在一个较高的浓度（如5μM），就能快速判断哪些抗体有结合活性。结合响应大于一定阈值的克隆被判定为“阳性”，可以进入下一轮筛选。

不过，单点结合也有明显的局限——它只能给出一个半定量的初步判断。单一浓度下的信号幅度并不能准确反映真实的亲和力大小。

多浓度KD：对重点候选做更深入评价

多浓度KD测定则是用一系列梯度稀释的抗原浓度（通常至少5个浓度点）去进行检测。浓度范围一般覆盖预估KD值的0.1倍到10倍之间。

在多浓度实验中，科学家将所有浓度下的结合与解离曲线放在一起进行全局拟合（Global Fitting），通常采用1:1结合模型。通过拟合，可以精确计算出三个关键参数：

KD值越低，亲和力越高。比如KD=1nM的抗体，比KD=100nM的抗体亲和力强100倍。

多浓度KD测定是抗体药物申报中正式动力学数据的“金标准”。但它需要消耗更多样品和时间，不适合大规模初筛。

各司其职的“黄金搭档”

在抗体发现的早期，先用单点结合进行高通量初筛，从数百个候选者中快速锁定“潜力股”；然后再对精选出的少数佼佼者进行多浓度KD的精确测定，获得可靠的动力学数据。

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这种“先粗筛、后精测”的策略，既保证了筛选效率，又确保了关键数据的准确性，是抗体药物研发中行之有效的“黄金组合”。

目前，君跻生物可以提供基于BLI技术的抗体亲和力检测服务，涵盖从单点结合快速筛选到多浓度KD精确表征的全流程需求，搭配君跻生物专为高通量筛选打造的【高通量上清表达服务】，助力您的抗体药物研发项目高效推进。

全流程自动化，让AI高通量筛选成为实验室日常

君跻生物依托自主研发的GentSyn-Exp3.0G-Lab全自动化生产线，打造了从基因设计、合成、验证到蛋白表达及抗体亲和力表征的一站式、高通量技术平台。传统研发模式依赖大量人工验证，而君跻生物用自动化重新定义了湿实验的效率和成本。

性价比革命：高通量表达筛选极大降低了单个样本的检测成本——IgG单抗259元/条、VHH纳米抗体129元/条。过去只够合成一两条抗体的预算，如今可在君跻生物完成数十条抗体的高通量筛选。

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